| 1 | Role of Phe-99 and Trp-196 of sepiapterin reductase from Chlorobium tepidum in the production of L-threo-tetrahydrobiopterin显示文摘从 Chlorobium 的 Sepiapterin reductase 微温嗯(cSR ) 催化不同 tetrahydrobiopterin (BH4 ) 的合成, L-threo-BH4,与哺乳动物的酶产品不同。cSR 的 3-D 水晶结构表明了产品配置由在保存得好的催化三个一组以内的底层绑定模式完全是坚定的。在 cSR, sepiapterin 在 Phe-99 和 Trp-196 的二芳香的侧链之间被叠并且旋转在从在老鼠 sepiapterin reductase 的位置的活性部位附近的约 180 度。在底层绑定证实他们的角色,我们变异 Phe-99 或 Trp-196 到丙氨酸(F99A, W196A ) 由指导地点的傻瓜发育不全和由动力学分析和微分扫描热量测定的净化的蛋白质的比较地检验的底层绑定。这些异种比野类型有更高的 K-m 价值。显著地, W196A 变化与 F99A 变化相比导致了更高的 K-m 增加。与结果一致,融化的温度(T-m ) 在变异的蛋白质面对 sepiapterin 是更低的,最糟是 W196A。这些调查结果显示二残余为在 cSR 的底层绑定是不可缺少的,并且 Trp-196 是比为不同立体异构生产的 Phe-99 更重要的。 | Supangat Sun Ok Park Kyung Hye Seo Sang Yeol Lee Young Shik Park Kon Ho Lee | 2008 | Acta Biochimica et Biophysica Sinica2008，40，6： | 1 |
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