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外膜孔道蛋白ompC、ompF的表达与大肠埃希菌耐药的相关性研究

查看全文 作　　者：[1]戎建荣;[1]王淑峰;Alison [2]S.Low;Ian [2]R.Booth 高影响力作者 机构地区：[1]山西省临床检验中心,山西太原030012;[2]苏格兰阿伯丁大学细胞与分子生物研究院,英国苏格兰高影响力机构 出　　处：《中华医院感染学杂志》索引2009年第19卷第6期,共4页高影响力期刊 基　　金：山西省医学留学人员重点基金项目(20000940) 摘　　要：目的研究外膜孔道蛋白ompC、ompF引起细胞膜通透性改变与大肠埃希菌(ECO)对抗菌药物形成耐药的相关性。方法设计复合引物对ompC全基因序列和ompF、ompA、fepA、cirA、chuA等基因序列进行扩增,回收PCR产物、钝化后测序;菌体外膜蛋白进行SDS-PAGE电泳,回收的目标膜蛋白条带经胰蛋白酶消化,采用质谱仪分析蛋白成分并进行蛋白序列的测定。结果SDS-PAGE电泳图谱和质谱分析显示,7株大肠埃希菌均有相应的外膜孔道蛋白ompC和ompA表达,无外膜孔道蛋白ompF表达;第6、7菌株的孔道蛋白ompC和ompA表达量明显减少,但有铁运输蛋白chuA、cirAf、epA的表达;基因扩增显示7株大肠埃希菌均有ompF产物,耐药性较强的第6、7菌株还有fhuA和cirA扩增产物,但产物fhuA的相对分子质量小于ECO-k12(少54 bp)。结论持续使用抗菌药物将导致细菌外膜孔蛋白ompF低表达或不表达,外膜孔蛋白ompC氨基酸序列的改变影响相应蛋白的表达,使细胞膜通透性降低,从而增加细菌对抗菌药物的耐药性;高度耐药的大肠埃希菌伴随代偿性铁运输蛋白chuA、cirA、fepA的表达,维持细菌的新陈代谢,保持其高水平耐药性。 关 键 词：细胞膜孔道蛋白 SDS-PAGE PCR 基因突变
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