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| 1 | 利用改进的手工克隆技术生产转GFP基因猪克隆胚胎显示文摘通过体细胞核移植(Somatic cell nuclear transfer,SCNT)培育转基因动物新个体是当前被广泛使用的技术之一,但其生产成本高和转基因囊胚形成率低在很大程度上制约了该技术的应用。文章报告对该技术的一些改进以提高其成功率并降低成本。首先将增强型绿色荧光基因(EGFP)导入猪胎儿成纤维细胞中,通过荧光观察EGFP的表达来筛选适合做细胞核移植的体细胞。这样避免了外源EGFP基因虽已整合至猪基因组但不表达的情况,保证供体细胞100%是表达目标蛋白(绿色荧光蛋白)的细胞;然后利用新一代体细胞核移植技术——手工克隆技术(Handmade cloning,HMC)将供体细胞与卵母细胞融合生产胚胎。共收集了4个批次378个肉用家猪的卵母细胞,经体外培养成熟后手工去核得到266个去核卵母细胞,与EGFP细胞融合后获得127个重构胚胎,将重构胚胎体外培养到144 h,得到转基因囊胚65个,平均囊胚率为52.1±8.3%。与传统SCNT相比,HMC不仅操作简便,而且能大幅提高核移植细胞的囊胚率。更为重要的是,改进的手工克隆技术摆脱了昂贵的显微操作仪,为产业化生产转基因动物提供了新的实用基础。 | 张鹏 杨珍珍 窦红伟 李伟杭 律波 Bolund Lars 杜玉涛 谭萍萍 马润林 | 2011 | 遗传2011，33，5： | 5 |
| 2 | Ecosystem services in urban areas显示文摘 | BOLUND P HUNHAMMAR S | 1999 | Ecological Economics1999，29，： | 1 |
| 3 | Oligonucleotide-priming methods for the chromosome-specific labelling of alpha satellite DNA in situ显示文摘 | J?rn E. Koch Steen K?lvraa Kirsten B. Petersen Niels Gregersen Lars Bolund | 1989 | Chromosoma1989，，4： | 1 |
| 4 | The impact of generalized malignant melanoma on quality of life evaluated by the EORTC questionnaire technique显示文摘 | Sigurdardottir V Bolund C Brandberg Y | 1993 | Qual Life Res1993，2，3： | 1 |
| 5 | Health related quality of life measured by EORTC QLQ - C30 reference values from a large sample of Swedish populating显示文摘 | Miehelson H Bolund C Nilsson B | 2000 | Acta Oncol2000，39，4： | 1 |
| 6 | Ecosystem services in urban areas显示文摘 | Bolund P Hunhammar S | | 0，，： | 1 |
| 7 | Ecosystem services in urban areas显示文摘 | Hunhammar S | 1999 | Ecological Economics1999，29，： | 1 |
| 8 | Flywheel energy and power storage systems显示文摘 | BOLUND B BERNHOFF H LEIJON M | 2007 | Renewable and Sustainable Energy Reviews2007，11，2： | 1 |
| 9 | Flywheel energy and power storage systems显示文摘 | BOLUND B BERNHOFF H LEIJON M | 2007 | Renewable and Sustainable Energy Reviews2007，11，2： | 1 |
| 10 | Ecosystem services in urban areas 显示文摘 | Bolund P S Hunhammar | 1999 | Ecological Economics1999，，29： | 1 |
| 11 | Ecosystem services in urban areas 显示文摘 | Bolund P Hunhammar S | 1999 | Ecological Economics1999，29，： | 1 |
| 12 | The impact of generalized Malignant melanoma on quality of life evaluated by the EORTC questionnaire technique 显示文摘 | Sigurdardottir V Bolund C Brand berg Y | 1993 | Qua[ Life Res1993，2，19： | 1 |
| 13 | The impact of generalized malignant melanoma on quality of life evaluated by the EORTC questionnaire technique显示文摘 | Sigurdardottir v Bolund C Brandberg Y | 1993 | Qual Life Res1993，，2： | 1 |
| 14 | Ecosystem services in urban areas显示文摘 | Bolund P Hunhmmar S | 1999 | Ecol Econ1999，29，： | 1 |
| 15 | Flywheel energy and power storage systems显示文摘 | Bolund B Bemhoff H Leijon M | 2007 | Renewable and Sustainable Energy Reviews2007，11，2： | 1 |
| 16 | The impact of generalized malignant melanoma on quality of life evaluated by the EORTC questionnaire technique显示文摘 | V. Sigurdardóttir C. Bolund Y. Brandberg M. Sullivan | 1993 | Quality of Life Research1993，，3： | 1 |
| 17 | Targeted Genome Editing by Recombinant Adeno-Associated Virus(rAAV) Vectors for Generating Genetically Modified Pigs显示文摘Recombinant 联系 adeno 的病毒(rAAV ) 向量广泛地为继承人的疾病的试验性的基因治疗被使用了。例如简单向量建设,高由相应再结合,和适用性指向频率到许多房间打的几个优点,为指向的染色体编辑使 rAAV 成为一条吸引人的途径。与由体的房间克隆原子转移(SCNT ) 结合了,这种技术最近成功地被改编了为膀胱的纤维变性作为模型产生指向基因的猪,世袭 tyrosinemia 类型 1,并且乳癌。这评论为指向的染色体在哺乳动物的房间编辑总结 rAAV 的发展并且为由相应再结合提高调停 rAAV 的指向频率提供策略。我们为指向的染色体在猪的主要成纤维细胞编辑讨论 rAAV 向量的当前的开发和申请,它随后被用作施主房间让 SCNT 产生克隆的遗传上设计的猪并且以后为指向基因的猪的产生向积极观点提供 rAAV。 | Yonglun Luo Emil Kofod-Olsen Rikke Christensen Charlotte Brandt Sorensen Lars Bolund | 2012 | Journal of Genetics and Genomics2012，39，6： | 1 |
| 18 | Upgrading generators with new tools and high voltage technology显示文摘 | Bolund B Thorburn K Sjostedt E | 2004 | The International Journal on Hydropower & Dams2004，，3： | 1 |
| 19 | Ecosystem services in urban areas 显示文摘 | Bolund P Hunhammar S | 1999 | Ecological Economics1999，29，： | 1 |
| 20 | Flywheel energy and power storage systems 显示文摘 | BOLUND B BERNHOFF H LEIJON M | 2007 | Renewable and Sustainable Energy Reviews2007，11，2： | 1 |
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